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EMSA

凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析。目前已用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。

服务概述Service Overview

凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析。目前已用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。

  • 验证型EMSA
    ⽤于验证探针是否含有可与蛋⽩质结合的位点。将结合位点突变,以突变探针为对照,野⽣型探针出现迁移条带,⽽突变探针未出现迁移条带,则说明该探针含有可与蛋⽩质结合的位点。
  • 竞争型EMSA
    探针序列不变,不含修饰基团的探针称为冷探针。冷探针与标记探针竞争性地与蛋⽩结合,冷探针不显影出迁移条带。以冷探针为对照,标记探针出现迁移条带,⽽冷探针迁移条带减弱或消失,则排除了假阳性⼲扰,增加实验结果准确性。
  • 超迁移EMSA
    使⽤⽬标蛋⽩的特异性抗体,蛋⽩-探针复合物被抗体识别并结合,该三聚复合物在凝胶电泳中,迁移速率再次增⼤,出现在蛋⽩-探针复合物的上⽅的超迁移条带,验证了探针与⽬的蛋⽩的特异性结合。
服务优势Our Strengths
  • 直接测定蛋白质与核酸的相互作用,提供定性和定量信息
  • 可用于研究多种类型的相互作用,如特异性结合、非特异性结合、序列特异性等
  • 技术简单,实验操作相对容易
  • 可以使用不同的标记方法和检测技术进行适应不同实验需求
服务流程Service Process
1
接收订单及样品
2
实验设计
3
合成探针
4
EMSA电泳凝胶配置
5
EMSA反应
6
电泳检测
7
显色反应
8
结果交付
客户提供Sample Requirements
  • 单块胶重组蛋⽩80-100ug(NTA或TE溶,不含变性剂),注明浓度,浓度不低于0.2mg/mL
  • 需提取核蛋白的细胞>1*10^7个细胞,⼲冰寄送;动物组织不少于400mg,植物组织不少于2g,建议客户在金开瑞表达重组蛋白;探针序列
  • 超迁移EMSA需提供IP级别抗体,不少于10μL(分装管需要提供抗体说明书)
注:以上送样量均为单组实验,若为多组实验,送样量均等⽐增加!!!涉及QPCR实验,特殊物种需提供内参序列。⼀定要有样本信息单,⽅便收样核对信息。
服务说明

特别说明:

▶ EMSA亦可⽤于研究RNA结合蛋⽩和其相关RNA序列的相互作⽤ 

▶ 如需要做超迁移,需提供IP级别的抗体

▶ EMSA与酵⺟单杂交,可共同验证同⼀个问题

服务名称 服务内容 交付内容及标准 服务周期(工作日)
EMSA EMSA 10个泳道(包含阴性和阳性对照) 10
附加单项 DNA探针合成  (≤59bp) 含竞争型冷探针 7
DNA探针合成  (60bp-300bp) 含竞争型冷探针 12
RNA探针合成  (<40bp) 含竞争型冷探针 7
联系方式CONTACT US
SUNYUAN BIO
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