服务概述Service Overview
萤(荧)光素(Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase。在荧光素酶的催化下,荧光素底物可以高效的转变成氧萤光素,同时发出强烈的光。 鉴于此,研究者利用荧光素酶开发出一套极其灵敏且使用方便的报告基因系统即双荧光素酶报告基因系统(Luc荧光素酶实验)。目前这一系统被广泛用于转录因子结合位点与启动子活性分析、RNA降解、信号转导、药物筛选、动物活体成像等领域。
服务推荐Service Content
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分类 |
服务/产品 |
| 转录因子与启动子研究 |
启动子活性验证 |
| 转录因子与启动子作用位点研究 | |
| miRNA与靶基因相互做用研究 | miRNA靶基因验证 |
| lncRNA吸附miRNA验证 | |
| circRNA吸附miRNA验证 | |
| ceRNA做用研究 | |
| 试剂盒 | 双/单荧光素酶检测试剂盒 |
技术路线Technical Route
1
根据实验目的确定设计方案
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2
构建Luciferase报告基因系统
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3
转染目的细胞
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4
测定荧光活性
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5
数据报告
技术特点Technical Comparison
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- 强大的学术支持团队协助设计科学合理的实验方案
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- 极简的HB-infusion无缝克隆策略极大缩减载体构建周期
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- 高效的LipoFiter转染试剂和病毒转导系统,确保结果稳定和可重复性
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- 详细的原始数据和实验结果分析,确保结论清晰可靠
应用实例Classic Cases
pGL3-Basic---用于转录因子结合位点与启动子活性分析。把待分析启动子区段构建到F-Luciferase上游,和转录因子共转染分析F-Luciferase活性即可反应启动子的活性高低。该质粒通常需要结合持续性表达R-Luciferase的载体作为内参以校正不同样品之间转染的转染效率(参考案例一)。
psiCHECK2---miRNA与其靶点相关分析,包括miRNA靶基因验证(参考案例二A和B)、lncRNA (参考案例三)与circRNA (参考案例四)吸附miRNA验证等。需要把miRNA潜在结合靶点克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR区域,然后与待测miRNA共同转染细胞内测定R-Luciferase活性高低,F-Luciferase (hLuc+)作为校正内参校正不同样品之间转染的转染效率。
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