酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测蛋白质相互作用的研究方法，因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点，现已被应用于多个研究领域。
核蛋白酵母双杂交：
核蛋白酵母双杂交技术最初由Fields等人在研究酵母转录因子GAL4性质时建立，后续经过不断改进已发展成为一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具，具有简便、灵敏、可反映蛋白在活细胞内互作真实情况的特点，被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。
膜蛋白酵母双杂交：
DUALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上，巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin) 进行蛋白质相互作用的筛选；泛素作为降解信号分子，人为分成两部分：N端 (Nub)，C端 (Cub)，互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。
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- 多年文库构建经验
- 4种优化的Total RNA提取技术方案可以有效保证Total RNA的纯度和完整性，保证样本的多样性
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- 采用多个筛选步骤
- 如报告基因的验证和酵母菌株的双重选择，可以减少非特异性相互作用的假阳性结果
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- 核/膜体系改造
- 一份cDNA即可同时构建两种文库；引入致死基因，减少空载产生
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- 纯净高效
- 优化建库试剂与流程，大幅降低空载背景，确保筛选结果真实可靠
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- 覆盖全面
- 感受态制备优化，获得更高库容量，不漏检低丰度互作靶点
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- 稳定可靠
- 针对植物材料特点全程优化，从难提RNA到高质量文库，提供稳定交付保障
酵母杂交文库构建：
酵母杂交文库筛选：
酵母杂交验证：
| 服务项目 | 应用 | 互补实验 |
| 酵⺟杂交⽂库构建 | 酵⺟杂交筛选 | / |
| 核酵⺟双杂交筛选 | 获得与已知蛋⽩互作的未知蛋⽩ | COIP，GST pulldown |
| 膜酵⺟双杂交筛选 | 研究膜蛋⽩之间的互作 | COIP，GST pulldown |
| 酵⺟单/双杂交验证 | 已知蛋⽩与蛋⽩/启动⼦之间的互作 | EMSA，双荧光素酶，COIP，GST pulldown |
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服务项目 |
客户提供 |
最终交付 |
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酵⺟杂交⽂库构建infusion同源重组
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组织/细胞 |
1) DH10B⼤肠⽂库菌液10ml, OD值 0.5-0.7, 满⾜滴度>1×10^7, 插⼊率>95%， 平均⽚段⻓度>1000bp（若物种本⾝⽚段较短，该指标可做调整）； 2) ⽂库质粒500μL， 浓度>1ug/μL |
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酵⺟杂交⽂库构建-Gateway |
组织/细胞 |
1) 交付初级⼤肠⽂库菌液2ml，次级⼤肠⽂库菌液6 mL ， 初级⽂库质粒200ug，次级⽂库质粒400ug，插⼊率>95%，平均⽚段⻓度>1000bp（若物种本⾝⽚段较短，该指标可做调整）； 2)完整的结题报告，内含建库过程中的原始图⽚及原始数据 |
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文库筛选 |
蛋白序列/基因序列/质粒 |
筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果 |
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酵母双杂交验证 |
酵母菌株，诱饵蛋白，猎物蛋白 |
完整版：交付结题报告及原始数据（包含⾃激活，共转化及稀释点种的原始图⽚） |
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简易版：交付结题报告及原始数据（只包含稀释点种原始图⽚） |