PRIMERNA · Digital Polymerase Chain Reaction
数字PCR检测

数字PCR(Digital Polymerase Chain Reaction,dPCR)是继传统PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)后的第三代核酸扩增检测技术。该技术通过将单一PCR反应体系分散为数万个独立的微反应单元,实现核酸模板的单分子扩增,扩增结束后通过阳性微反应单元计数,结合泊松分布算法精准计算样本核酸拷贝数。

数字PCR检测
Digital Polymerase Chain Reaction
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服务概述Service Overview

数字PCR(Digital Polymerase Chain Reaction,dPCR)是继传统PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)后的第三代核酸扩增检测技术。该技术通过将单一PCR反应体系分散为数万个独立的微反应单元,实现核酸模板的单分子扩增,扩增结束后通过阳性微反应单元计数,结合泊松分布算法精准计算样本核酸拷贝数。与传统qPCR技术,数字PCR检测具备多项核心优势:

绝对定量,无需标准曲线:摒弃传统定量依赖标准曲线的检测模式,通过单分子扩增与阳性微滴计数直接计算核酸原始拷贝数,杜绝标准曲线误差,定量结果更精准、更贴合样本真实浓度。

超高灵敏度,检出下限极低:可精准检测单拷贝级别的核酸模板,有效识别样本中低丰度突变、微量残留核酸、低浓度病毒模板,针对稀有突变、微量病原体检测优势显著,检出限可达0.001%突变丰度。

高耐受性,抗干扰能力强:对样本中抑制物、杂质、轻微核酸降解不敏感,可有效应对复杂样本体系,如血液、组织、粪便、环境样本、粗提核酸样本等,检测稳定性远超qPCR。

高精准度与重复性:独立微反应体系规避了模板竞争、非特异性扩增干扰,批内、批间实验误差极小,CV值<5%,实验重复性、可靠性极高。

无需Ct值依赖:终点法检测不受扩增效率影响,可精准区分微小浓度差异样本,尤其适合低浓度、差异小的样本定量分析。

服务内容Service Content
服务方向 说明 价格
稀有突变检测 肿瘤液体活检(ctDNA)、低频等位基因检测,灵敏度可达 0.01% 询价
病原体绝对定量 HIV、HBV、CMV、SARS-CoV-2 等病毒载量直接定量,无需标准品 询价
拷贝数变异(CNV)分析 基因拷贝数精确判定,转基因成分检测,染色体微缺失分析 询价
基因表达与miRNA定量 低丰度转录本、微小RNA的绝对表达量测定 询价
基因编辑/脱靶检测 CRISPR 靶向效率及脱靶事件的绝对定量分析 询价
实验流程Experimental Procedure

送检要求
  • 样本类型
    支持基因组DNA、质粒DNA、cDNA、RNA、病毒核酸、细胞上清、血液样本、组织核酸、环境核酸等各类纯化核酸样本;特殊原始样本(组织、细胞、菌体等)可提供核酸提取服务。
  • 样本质量标准
    核酸浓度:推荐浓度20–100 ng/μL,最低上机浓度不低于1 ng/μL;
    核酸纯度:OD260/280值控制在1.8–2.0(DNA)、2.0–2.2(RNA),无蛋白、多糖、有机溶剂残留;
    样本完整性:无明显降解、无反复冻融,RNA样本需严格无酶、无降解;
    杂质要求:无高浓度盐离子、无抑制扩增杂质,避免影响微滴生成与扩增效率。
  • 样本包装与运输
    核酸样本采用无菌无酶离心管分装,密封严实,标注清晰样本编号、名称、靶点信息;
    DNA样本常温短途运输、低温冷藏长期运输;检测RNA水平基因样本全程干冰运输,避免降解;
    所有样本独立包装,防止交叉污染,附带样本信息清单。
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