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Southern/Northern blot

Southern Blot(DNA印迹杂交)与Northern Blot(RNA印迹杂交)是分子生物学领域经典且权威的核酸检测技术,依托核酸分子碱基互补配对原理,实现特定核酸序列的特异性检测与分析。

服务概述

Southern Blot(DNA印迹杂交)与Northern Blot(RNA印迹杂交)是分子生物学领域经典且权威的核酸检测技术,依托核酸分子碱基互补配对原理,实现特定核酸序列的特异性检测与分析。两项技术分别靶向基因组DNA与样本RNA,可精准验证核酸片段大小、拷贝数、整合情况及基因转录表达水平,结果准确性、重复性高,是基因鉴定、转基因验证、表达分析、菌株分型等研究的金标准技术,广泛应用于基础科研、生物医药、农业育种、基因诊断等领域。我公司提供Southern/Northern Blot全套实验服务,涵盖样品预处理、核酸提取纯化、酶切/电泳、转膜、探针标记、杂交孵育、洗膜显色、图像分析及报告撰写全流程,支持DIG地高辛标记、同位素标记等主流检测方案,可根据客户实验需求定制个性化实验方案,全程标准化操作,原始数据完整留存。

技术原理Technical Principle
  • Southern Blot 技术原理(DNA检测)
    提取样本基因组DNA,通过限制性内切酶特异性酶切获得大小不一的DNA片段,经琼脂糖凝胶电泳按分子量分离后,对凝胶进行碱变性预处理,通过毛细管转膜或电转技术将单链DNA片段转移至尼龙膜/硝酸纤维素膜上并固定。随后利用标记(DIG/同位素)的特异性DNA探针,基于碱基互补配对与膜上目标DNA片段特异性杂交,通过显色或放射显影检测杂交信号,最终分析目标DNA的片段大小、拷贝数、基因整合位点及突变情况。
  • Northern Blot 技术原理(RNA检测)
    提取样本总RNA,利用变性琼脂糖凝胶电泳规避RNA二级结构干扰,按分子量分离完整RNA片段,通过转膜工艺将RNA转移并固定于固相膜载体。采用标记的特异性探针与膜上目标RNA进行杂交反应,通过信号显色检测,精准分析目标基因的转录本大小、可变剪接变体、mRNA表达丰度,可直观反映基因转录水平差异。

对比维度 Southern Blot Northern Blot
检测对象 基因组DNA 总RNA/mRNA
核心预处理 限制性内切酶酶切、DNA变性 RNA变性电泳、无酶无菌防降解处理
核心应用 基因拷贝数检测、转基因整合验证、DNA片段鉴定等 基因表达水平检测、转录本鉴定、可变剪接分析、RNA稳定性研究
样本要求 DNA完整性好、无蛋白/多糖污染 RNA无降解、无RNase污染、纯度高
收费 核酸提取 DNA提取200元/样,3个工作日 RNA提取300元/样品,5个工作日
探针定制 1800元/探针,5个工作日 1800元/探针,5个工作日
基因检测 4000元/膜,10-15个工作日 5500元/膜,15-20个工作日
实验流程Experimental Process

样品要求Sample Requirements
  • 样本类型
    新鲜动植物组织、细胞、菌体、总RNA原液等
  • 样品用量
    新鲜组织≥30mg,细胞≥5×10⁵个,总RNA≥10μg
  • 质量标准
    RNA完整无降解,RIN值≥7.0,OD260/280=2.0~2.2,无基因组DNA污染
  • 特殊要求
    全程无RNase污染,样本采集后快速液氮速冻,干冰运输,禁止反复冻融
交付内容Deliverables
  • 完整实验结题报告
    包含实验原理、材料试剂、详细操作步骤、实验参数、数据分析结果
  • 原始实验数据
    核酸质检图谱、电泳原始图片、转膜显色原始成像图
  • 辅助资料
    探针序列信息、酶切方案说明、实验原始记录
图片案例Image Cases

联系方式CONTACT US
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