服务概述Service Overview
RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA 结合蛋白免疫沉淀)主要是运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA 进行q-PCR验证或者测序分析。RIP 是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,可以帮助我们发现miRNA的调节靶点。
服务优势Our Strengths
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- 高灵敏度和高特异性
- RIP技术能够高度富集RNA和与之相互作用的蛋白质,具有较高的灵敏度和特异性
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- 低样本量要求
- RIP技术可以在较少的细胞或组织样本中进行实验,减少实验成本和样本需求
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- 适用于多种RNA种类
- RIP技术适用于不同类型的RNA研究,包括长链非编码RNA和编码RNA
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- 不需要事先了解RNA-蛋白质相互作用的信息
- 可用于探索未知的RNA-蛋白质相互作用
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- 可量化分析
- RIP技术可以进行定量分析,评估不同条件下的相互作用的强度和稳定性
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- 结合其他技术的联合应用
- RIP技术可以与其他技术相结合,如RNA测序、蛋白质组学和转录组学等,进行综合分析,深入揭示RNA-蛋白质相互作用的功能和调控机制
服务流程Service Process
1
载体构建及转染
→
2
细胞裂解液获取
→
3
磁珠的准备
→
4
RNA结合蛋白免疫沉淀
→
5
RNA 纯化
→
6
RNA反转录及cDNA 验证(若需测序分析请另外咨询)
→
7
数据分析及Figure制作
客户提供Sample Requirements
目的蛋白抗体(可用于IP)及其说明书;需检测的样品;目的基因、目的蛋白信息。
送样要求:
▶ 细胞:3x10^7个细胞,离心后收集细胞沉淀,沉淀体积约为80-100μL,干冰运输。
▶ 组织:动物组织不少于0.5g;植物组织不少于1 g,新鲜幼嫩组织,干冰寄送;离体后迅速超低温处理并-80℃冻存的组织样品,干冰运输;
最终交付Deliverables
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- 原始数据、结果图片(包括阴性对照结果)
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- 标准实验报告(包括详细的材料与方法)
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- SCI标准Result Figure
服务说明Service Content
| 服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
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RIP-q-PCR
(Protein-RNA)
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WB检测诱饵本底表达,qPCR检测猎物本底表达 |
1个样本,猎物诱饵各⼀个指标 | 20 |
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RIP |
富集2次:IgG、IP各1次 | ||
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RIP后WB |
IgG,IP,input各1次 | ||
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qPCR |
IgG,IP,input各1个泳道 | ||
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Ago2-RIP
(miRNA-RNA)
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QPCR检测目的RNA 的本底表达 |
含miRNA过表达和对照组,每组含IgG、Ago、Input检测 | 28 |
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RIP |
富集2次:IgG、IP各1次 | ||
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QPCR |
IgG,IP,input各1个泳道 | ||
| MeRIP-qPCR |
总RNA提取 |
/ | 20 |
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RNA片段化及验证 |
RNA片段化质控图 | ||
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MeRIP富集(包含Input组和IP组) |
富集1次,IP组 | ||
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RNA洗脱、纯化 |
/ | ||
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qPCR定量检测 |
qPCR结果 |
联系方式CONTACT US
常见问题FAQ
Q1:RIP试验主要应用哪些方面?
Q2:RIP可以分提核浆的RNA-蛋白质复合物吗?