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RIP-qPCR

RIP技术是研究RNA-蛋白质相互作用的重要工具,它可以揭示RNA和蛋白质之间的功能关系、调控机制以及在疾病发生和发展中的作用。

服务概述Service Overview
RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA 结合蛋白免疫沉淀)主要是运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA 进行q-PCR验证或者测序分析。RIP 是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,可以帮助我们发现miRNA的调节靶点。
服务优势Our Strengths
  • 高灵敏度和高特异性
    RIP技术能够高度富集RNA和与之相互作用的蛋白质,具有较高的灵敏度和特异性
  • 低样本量要求
    RIP技术可以在较少的细胞或组织样本中进行实验,减少实验成本和样本需求
  • 适用于多种RNA种类
    RIP技术适用于不同类型的RNA研究,包括长链非编码RNA和编码RNA
  • 不需要事先了解RNA-蛋白质相互作用的信息
    可用于探索未知的RNA-蛋白质相互作用
  • 可量化分析
    RIP技术可以进行定量分析,评估不同条件下的相互作用的强度和稳定性
  • 结合其他技术的联合应用
    RIP技术可以与其他技术相结合,如RNA测序、蛋白质组学和转录组学等,进行综合分析,深入揭示RNA-蛋白质相互作用的功能和调控机制
服务流程Service Process
1
载体构建及转染
2
细胞裂解液获取
3
磁珠的准备
4
RNA结合蛋白免疫沉淀
5
RNA 纯化
6
RNA反转录及cDNA 验证(若需测序分析请另外咨询)
7
数据分析及Figure制作
客户提供Sample Requirements

目的蛋白抗体(可用于IP)及其说明书;需检测的样品;目的基因、目的蛋白信息。

送样要求:

▶ 细胞:3x10^7个细胞,离心后收集细胞沉淀,沉淀体积约为80-100μL,干冰运输。

▶ 组织:动物组织不少于0.5g;植物组织不少于1 g,新鲜幼嫩组织,干冰寄送;离体后迅速超低温处理并-80℃冻存的组织样品,干冰运输;

最终交付Deliverables
  • 原始数据、结果图片(包括阴性对照结果)
  • 标准实验报告(包括详细的材料与方法)
  • SCI标准Result Figure
服务说明Service Content
服务名称 服务内容 交付内容及标准 服务周期(工作日)
RIP-q-PCR
(Protein-RNA)

WB检测诱饵本底表达,qPCR检测猎物本底表达

1个样本,猎物诱饵各⼀个指标 20

RIP

富集2次:IgG、IP各1次

RIP后WB

IgG,IP,input各1次

qPCR

IgG,IP,input各1个泳道
Ago2-RIP
(miRNA-RNA)

QPCR检测目的RNA 的本底表达

含miRNA过表达和对照组,每组含IgG、Ago、Input检测 28

RIP

富集2次:IgG、IP各1次

QPCR

IgG,IP,input各1个泳道
MeRIP-qPCR

总RNA提取

/ 20

RNA片段化及验证

RNA片段化质控图

MeRIP富集(包含Input组和IP组)

富集1次,IP组

RNA洗脱、纯化

/

qPCR定量检测

qPCR结果
联系方式CONTACT US
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